बाँझ कक्ष मानकीकरण प्रक्रियाएँ और स्वीकृति विनिर्देश

1. उद्देश्य: इस प्रक्रिया का उद्देश्य सड़न रोकनेवाला संचालन और बाँझ कमरों की सुरक्षा के लिए एक मानकीकृत प्रक्रिया प्रदान करना है।

2. आवेदन का दायरा: जैविक परीक्षण प्रयोगशाला

3. जिम्मेदार व्यक्ति: क्यूसी पर्यवेक्षक परीक्षक

4.परिभाषा: कोई नहीं

5. सुरक्षा सावधानियाँ

माइक्रोबियल संदूषण को रोकने के लिए सख्ती से सड़न रोकनेवाला संचालन करें;ऑपरेटरों को स्टेराइल रूम में प्रवेश करने से पहले यूवी लैंप बंद कर देना चाहिए।

6.प्रक्रियाएँ

6.1.स्टेराइल रूम को स्टेराइल ऑपरेशन रूम और बफर रूम से सुसज्जित किया जाना चाहिए।स्टेराइल ऑपरेशन रूम की सफाई कक्षा 10000 तक पहुंचनी चाहिए। इनडोर तापमान 20-24 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखा जाना चाहिए और आर्द्रता 45-60% पर बनाए रखी जानी चाहिए।स्वच्छ बेंच की स्वच्छता कक्षा 100 तक पहुंचनी चाहिए।

6.2.बाँझ कमरे को साफ रखा जाना चाहिए, और संदूषण को रोकने के लिए मलबे को ढेर करना सख्त मना है।

6.3.सभी स्टरलाइज़ेशन उपकरण और कल्चर मीडिया के संदूषण को सख्ती से रोकें।जो दूषित हैं उनका उपयोग बंद कर देना चाहिए।

6.4.बाँझ कमरे को कार्यशील सांद्रता वाले कीटाणुनाशकों से सुसज्जित किया जाना चाहिए, जैसे कि 5% क्रेसोल घोल, 70% अल्कोहल, 0.1% क्लोरमेथिओनिन घोल, आदि।

6.5.स्टेराइल कमरे को नियमित रूप से कीटाणुरहित किया जाना चाहिए और उचित कीटाणुनाशक से साफ किया जाना चाहिए ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि स्टेराइल कमरे की सफाई आवश्यकताओं को पूरा करती है।

6.6.सभी उपकरण, यंत्र, बर्तन और अन्य वस्तुएं जिन्हें रोगाणुरहित कमरे में लाने की आवश्यकता है, उन्हें कसकर लपेटा जाना चाहिए और उचित तरीकों से रोगाणुरहित किया जाना चाहिए।

6.7.स्टेराइल रूम में प्रवेश करने से पहले, कर्मचारियों को अपने हाथ साबुन या कीटाणुनाशक से धोने चाहिए, और फिर स्टेराइल रूम में प्रवेश करने से पहले बफर रूम में विशेष काम के कपड़े, जूते, टोपी, मास्क और दस्ताने पहनने चाहिए (या 70% इथेनॉल के साथ अपने हाथों को फिर से पोंछना चाहिए)।जीवाणु कक्ष में ऑपरेशन करना।

6.8.बाँझ कमरे का उपयोग करने से पहले, बाँझ कमरे में पराबैंगनी लैंप को 30 मिनट से अधिक समय तक विकिरण और नसबंदी के लिए चालू किया जाना चाहिए, और उसी समय हवा के प्रवाह के लिए साफ बेंच को चालू करना चाहिए।ऑपरेशन पूरा होने के बाद, रोगाणुहीन कमरे को समय पर साफ किया जाना चाहिए और फिर 20 मिनट के लिए पराबैंगनी प्रकाश द्वारा रोगाणुरहित किया जाना चाहिए।

6.9.निरीक्षण से पहले, परीक्षण नमूने की बाहरी पैकेजिंग को बरकरार रखा जाना चाहिए और संदूषण को रोकने के लिए इसे खोला नहीं जाना चाहिए।निरीक्षण से पहले, बाहरी सतह को कीटाणुरहित करने के लिए 70% अल्कोहल कॉटन बॉल का उपयोग करें।

6.10.प्रत्येक ऑपरेशन के दौरान, सड़न रोकनेवाला ऑपरेशन की विश्वसनीयता की जांच करने के लिए एक नकारात्मक नियंत्रण किया जाना चाहिए।

6.11.जीवाणु तरल को अवशोषित करते समय, आपको इसे अवशोषित करने के लिए सक्शन बॉल का उपयोग करना चाहिए।भूसे को सीधे अपने मुँह से न छुएँ।

6.12.प्रत्येक उपयोग से पहले और बाद में टीकाकरण सुई को लौ द्वारा निष्फल किया जाना चाहिए।ठंडा होने के बाद कल्चर को टीका लगाया जा सकता है।

6.13.स्ट्रॉ, टेस्ट ट्यूब, पेट्री डिश और बैक्टीरियल तरल वाले अन्य बर्तनों को कीटाणुशोधन के लिए 5% लाइसोल घोल वाली स्टरलाइज़ेशन बाल्टी में भिगोया जाना चाहिए और 24 घंटे के बाद बाहर निकालकर धोया जाना चाहिए।

6.14.यदि मेज या फर्श पर जीवाणुयुक्त तरल पदार्थ गिरा हुआ है, तो आपको इसे उपचारित करने से पहले तुरंत 5% कार्बोलिक एसिड घोल या 3% लाइसोल को दूषित क्षेत्र पर कम से कम 30 मिनट के लिए डालना चाहिए।जब काम के कपड़े और टोपी जीवाणु द्रव से दूषित हो जाते हैं, तो उन्हें तुरंत उतार दिया जाना चाहिए और उच्च दबाव वाली भाप नसबंदी के बाद धोया जाना चाहिए।

6.15.जीवित बैक्टीरिया युक्त सभी वस्तुओं को नल के नीचे धोने से पहले कीटाणुरहित किया जाना चाहिए।सीवर को प्रदूषित करना सख्त वर्जित है।

6.16.स्टेराइल रूम में कॉलोनियों की संख्या की मासिक जांच की जानी चाहिए।साफ बेंच को खोलकर, 90 मिमी के आंतरिक व्यास के साथ कई बाँझ पेट्री डिश लें, और लगभग 15 मिलीलीटर पोषक तत्व अगर कल्चर माध्यम को एसेप्टिक रूप से इंजेक्ट करें जिसे पिघलाया गया है और लगभग 45 डिग्री सेल्सियस तक ठंडा किया गया है।जमने के बाद इसे 30 से 35 डिग्री तापमान पर उल्टा करके 48 घंटे के लिए ℃ इनक्यूबेटर में रखें।बाँझपन सिद्ध करने के बाद 3 से 5 प्लेटें लें और उन्हें काम करने की स्थिति के बाएँ, मध्य और दाएँ पर रखें।ढक्कन खोलने और उन्हें 30 मिनट तक खुला रखने के बाद, उन्हें 48 घंटों के लिए 30 से 35°C इनक्यूबेटर में उल्टा रखें और बाहर निकालें।परीक्षण करना।कक्षा 100 के स्वच्छ क्षेत्र में प्लेट पर विविध जीवाणुओं की औसत संख्या 1 कॉलोनी से अधिक नहीं होनी चाहिए, और कक्षा 10000 के स्वच्छ कमरे में औसत संख्या 3 कॉलोनियों से अधिक नहीं होनी चाहिए।यदि सीमा पार हो गई है, तो बार-बार निरीक्षण आवश्यकताओं को पूरा करने तक बाँझ कमरे को पूरी तरह से कीटाणुरहित किया जाना चाहिए।

7. "ड्रग हाइजेनिक इंस्पेक्शन मेथड्स" और "चाइना स्टैंडर्ड ऑपरेटिंग प्रैक्टिसेज फॉर ड्रग इंस्पेक्शन" में अध्याय (स्टेरिलिटी इंस्पेक्शन मेथड) देखें।

8. वितरण विभाग: गुणवत्ता प्रबंधन विभाग

स्वच्छ कक्ष तकनीकी मार्गदर्शन:

एक बाँझ वातावरण और बाँझ सामग्री प्राप्त करने के बाद, हमें एक विशिष्ट ज्ञात सूक्ष्मजीव का अध्ययन करने या उनके कार्यों का उपयोग करने के लिए एक बाँझ अवस्था बनाए रखनी चाहिए।अन्यथा, बाहर से विभिन्न सूक्ष्मजीव आसानी से मिल सकते हैं। बाहर से अप्रासंगिक सूक्ष्मजीवों के मिश्रण की घटना को सूक्ष्म जीव विज्ञान में दूषित बैक्टीरिया कहा जाता है।सूक्ष्मजीवविज्ञानी कार्य में संदूषण को रोकना एक महत्वपूर्ण तकनीक है।एक ओर पूर्ण नसबंदी और दूसरी ओर संदूषण की रोकथाम सड़न रोकने वाली तकनीक के दो पहलू हैं।इसके अलावा, हमें अध्ययन के तहत सूक्ष्मजीवों, विशेष रूप से रोगजनक सूक्ष्मजीवों या आनुवंशिक रूप से इंजीनियर सूक्ष्मजीवों जो प्रकृति में मौजूद नहीं हैं, को हमारे प्रयोगात्मक कंटेनरों से बाहरी वातावरण में भागने से रोकना चाहिए।इन उद्देश्यों के लिए, सूक्ष्म जीव विज्ञान में, कई उपाय हैं।

स्टेराइल रूम आमतौर पर माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशाला में विशेष रूप से स्थापित एक छोटा कमरा होता है।चादरों और कांच से बनाया जा सकता है।क्षेत्रफल बहुत बड़ा नहीं होना चाहिए, लगभग 4-5 वर्ग मीटर और ऊंचाई लगभग 2.5 मीटर होनी चाहिए।स्टेराइल रूम के बाहर एक बफर रूम स्थापित किया जाना चाहिए।वायु प्रवाह को विविध बैक्टीरिया लाने से रोकने के लिए बफर रूम का दरवाजा और स्टेराइल रूम का दरवाजा एक ही दिशा में नहीं होना चाहिए।स्टेराइल रूम और बफर रूम दोनों वायुरोधी होने चाहिए।इनडोर वेंटिलेशन उपकरण में वायु निस्पंदन उपकरण होना चाहिए।स्टेराइल कमरे का फर्श और दीवारें चिकनी, गंदगी जमा करना मुश्किल और साफ करने में आसान होनी चाहिए।कार्य की सतह समतल होनी चाहिए।स्टेराइल रूम और बफर रूम दोनों पराबैंगनी रोशनी से सुसज्जित हैं।स्टेराइल कमरे में पराबैंगनी रोशनी काम की सतह से 1 मीटर की दूरी पर हैं।रोगाणुरहित कमरे में प्रवेश करने वाले कर्मचारियों को रोगाणुरहित कपड़े और टोपी पहननी चाहिए।

वर्तमान में, बाँझ कमरे ज्यादातर माइक्रोबायोलॉजी कारखानों में मौजूद हैं, जबकि सामान्य प्रयोगशालाएँ स्वच्छ बेंच का उपयोग करती हैं।स्वच्छ बेंच का मुख्य कार्य काम की सतह पर सूक्ष्मजीवों सहित विभिन्न छोटी धूल को हटाने के लिए लैमिनर वायु प्रवाह उपकरण का उपयोग करना है।विद्युत उपकरण हवा को हेपा फिल्टर से गुजरने और फिर काम की सतह में प्रवेश करने की अनुमति देता है, ताकि काम की सतह हमेशा बहने वाली बाँझ हवा के नियंत्रण में रहे।इसके अलावा, बाहरी बैक्टीरिया हवा को प्रवेश करने से रोकने के लिए बाहर की तरफ एक उच्च गति वाला हवा का पर्दा है।

कठिन परिस्थितियों वाले स्थानों में साफ बेंच के स्थान पर लकड़ी के स्टेराइल बक्सों का भी उपयोग किया जा सकता है।स्टेराइल बॉक्स की संरचना सरल है और इसे स्थानांतरित करना आसान है।बॉक्स के सामने दो छेद होते हैं, जो संचालन में न होने पर पुश-पुल दरवाजों द्वारा अवरुद्ध हो जाते हैं।ऑपरेशन के दौरान आप अपनी भुजाएँ अंदर की ओर फैला सकते हैं।आंतरिक संचालन की सुविधा के लिए सामने का ऊपरी हिस्सा ग्लास से सुसज्जित है।बॉक्स के अंदर एक पराबैंगनी लैंप है, और किनारे पर छोटे दरवाजे के माध्यम से बर्तन और बैक्टीरिया रखे जा सकते हैं।

एसेप्टिक ऑपरेटिंग तकनीक वर्तमान में न केवल सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान और अनुप्रयोगों में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है, बल्कि कई जैव प्रौद्योगिकी में भी व्यापक रूप से उपयोग की जाती है।उदाहरण के लिए, ट्रांसजेनिक तकनीक, मोनोक्लोनल एंटीबॉडी तकनीक आदि।