बाँझ कमरे के मानकीकरण प्रक्रियाएँ और स्वीकृति विनिर्देश

1. उद्देश्य: इस प्रक्रिया का उद्देश्य रोगाणुरहित संचालन और रोगाणुरहित कमरों की सुरक्षा के लिए एक मानकीकृत प्रक्रिया प्रदान करना है।

2. आवेदन का दायरा: जैविक परीक्षण प्रयोगशाला

3. जिम्मेदार व्यक्ति: QC पर्यवेक्षक परीक्षक

4.परिभाषा: कोई नहीं

5. सुरक्षा सावधानियां

सूक्ष्मजीवी संदूषण को रोकने के लिए सख्ती से एसेप्टिक संचालन करें; ऑपरेटरों को जीवाणुरहित कमरे में प्रवेश करने से पहले यूवी लैंप बंद कर देना चाहिए।

6.प्रक्रियाएँ

6.1. जीवाणुरहित कक्ष में एक जीवाणुरहित शल्य-चिकित्सा कक्ष और एक बफर कक्ष होना चाहिए। जीवाणुरहित शल्य-चिकित्सा कक्ष की स्वच्छता श्रेणी 10000 तक होनी चाहिए। अंदर का तापमान 20-24°C और आर्द्रता 45-60% पर बनाए रखी जानी चाहिए। स्वच्छ बेंच की स्वच्छता श्रेणी 100 तक होनी चाहिए।

6.2. रोगाणुरहित कमरे को साफ-सुथरा रखा जाना चाहिए, तथा संदूषण को रोकने के लिए मलबा जमा करना सख्त मना है।

6.3. सभी स्टरलाइज़ेशन उपकरणों और कल्चर मीडिया के संदूषण को सख्ती से रोकें। जो उपकरण संदूषित हैं, उनका उपयोग बंद कर देना चाहिए।

6.4. रोगाणुरहित कक्ष में कार्यशील सांद्रता वाले कीटाणुनाशक उपलब्ध होने चाहिए, जैसे 5% क्रेसोल घोल, 70% अल्कोहल, 0.1% क्लोरमेथियोनीन घोल, आदि।

6.5. जीवाणुरहित कक्ष को नियमित रूप से जीवाणुरहित किया जाना चाहिए तथा उचित रोगाणुनाशक से साफ किया जाना चाहिए ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि जीवाणुरहित कक्ष की स्वच्छता आवश्यकताओं के अनुरूप है।

6.6. सभी उपकरण, यंत्र, बर्तन और अन्य वस्तुएं जिन्हें जीवाणुरहित कक्ष में लाया जाना है, उन्हें कसकर लपेटा जाना चाहिए और उचित तरीकों से जीवाणुरहित किया जाना चाहिए।

6.7. जीवाणुरहित कक्ष में प्रवेश करने से पहले, कर्मचारियों को साबुन या कीटाणुनाशक से अपने हाथ धोने चाहिए, और फिर बफर कक्ष में विशेष कार्य वस्त्र, जूते, टोपी, मास्क और दस्ताने पहनने चाहिए (या 70% इथेनॉल से अपने हाथ फिर से पोंछने चाहिए)। जीवाणुरहित कक्ष में कार्य करें।

6.8. बाँझ कमरे का उपयोग करने से पहले, बाँझ कमरे में पराबैंगनी लैंप को विकिरण और स्टरलाइज़ेशन के लिए 30 मिनट से अधिक समय तक चालू रखना चाहिए, और साथ ही हवा के प्रवाह के लिए साफ़ बेंच को भी चालू रखना चाहिए। ऑपरेशन पूरा होने के बाद, बाँझ कमरे को समय पर साफ़ किया जाना चाहिए और फिर 20 मिनट के लिए पराबैंगनी प्रकाश से स्टरलाइज़ किया जाना चाहिए।

6.9. निरीक्षण से पहले, परीक्षण नमूने की बाहरी पैकेजिंग को यथावत रखा जाना चाहिए और संदूषण से बचने के लिए उसे खोला नहीं जाना चाहिए। निरीक्षण से पहले, बाहरी सतह को कीटाणुरहित करने के लिए 70% अल्कोहल युक्त कॉटन बॉल का उपयोग करें।

6.10. प्रत्येक ऑपरेशन के दौरान, एसेप्टिक ऑपरेशन की विश्वसनीयता की जांच के लिए नकारात्मक नियंत्रण किया जाना चाहिए।

6.11. जीवाणु द्रव को सोखते समय, उसे सोखने के लिए सक्शन बॉल का उपयोग करें। स्ट्रॉ को सीधे अपने मुँह से न छुएँ।

6.12. प्रत्येक उपयोग से पहले और बाद में टीका लगाने वाली सुई को आग से जीवाणुरहित किया जाना चाहिए। ठंडा होने के बाद, कल्चर का टीका लगाया जा सकता है।

6.13. जीवाणु द्रव युक्त स्ट्रॉ, टेस्ट ट्यूब, पेट्री डिश और अन्य बर्तनों को कीटाणुशोधन के लिए 5% लाइसोल घोल युक्त स्टरलाइज़ेशन बाल्टी में भिगोया जाना चाहिए, और 24 घंटे बाद बाहर निकालकर धोया जाना चाहिए।

6.14. यदि मेज़ या फ़र्श पर जीवाणु द्रव गिरा हो, तो आपको दूषित क्षेत्र पर तुरंत 5% कार्बोलिक अम्ल घोल या 3% लाइसोल डालना चाहिए और फिर कम से कम 30 मिनट तक उपचार करना चाहिए। यदि काम के कपड़े और टोपियाँ जीवाणु द्रव से दूषित हों, तो उन्हें तुरंत उतारकर उच्च दाब वाली भाप से स्टरलाइज़ करके धोना चाहिए।

6.15. जीवित जीवाणुओं वाली सभी वस्तुओं को नल के नीचे धोने से पहले कीटाणुरहित किया जाना चाहिए। सीवर को प्रदूषित करना सख्त वर्जित है।

6.16. बाँझ कमरे में कॉलोनियों की संख्या मासिक रूप से जाँची जानी चाहिए। स्वच्छ बेंच को खुला रखकर, 90 मिमी के आंतरिक व्यास वाले कई बाँझ पेट्री डिश लें, और लगभग 15 मिलीलीटर पोषक अगर कल्चर माध्यम को एसेप्टिक रूप से इंजेक्ट करें जिसे पिघलाया गया है और लगभग 45°C तक ठंडा किया गया है। जमने के बाद, इसे 30 से 35 ℃ इनक्यूबेटर में 48 घंटे के लिए उल्टा रखें। बाँझपन साबित करने के बाद, 3 से 5 प्लेटें लें और उन्हें काम करने की स्थिति के बाईं, मध्य और दाईं ओर रखें। कवर खोलने और उन्हें 30 मिनट के लिए उजागर करने के बाद, उन्हें 30 से 35 °C इनक्यूबेटर में 48 घंटे के लिए उल्टा रखें और उन्हें बाहर निकालें। जांच करें। एक वर्ग 100 स्वच्छ क्षेत्र में प्लेट पर विविध बैक्टीरिया की औसत संख्या 1 कॉलोनी से अधिक नहीं होनी चाहिए यदि सीमा पार हो जाती है, तो जीवाणुरहित कमरे को तब तक पूरी तरह से कीटाणुरहित किया जाना चाहिए जब तक कि बार-बार निरीक्षण से आवश्यकताएं पूरी न हो जाएं।

7. "औषधि स्वच्छता निरीक्षण विधियाँ" और "औषधि निरीक्षण के लिए चीन मानक संचालन पद्धतियाँ" में अध्याय (बाँझपन निरीक्षण विधि) का संदर्भ लें।

8. वितरण विभाग: गुणवत्ता प्रबंधन विभाग

स्वच्छ कक्ष तकनीकी मार्गदर्शन:

एक जीवाणुरहित वातावरण और जीवाणुरहित सामग्री प्राप्त करने के बाद, किसी विशिष्ट ज्ञात सूक्ष्मजीव का अध्ययन करने या उनके कार्यों का उपयोग करने के लिए हमें जीवाणुरहित अवस्था बनाए रखनी होगी। अन्यथा, बाहर से विभिन्न सूक्ष्मजीव आसानी से मिल सकते हैं। बाहर से अप्रासंगिक सूक्ष्मजीवों के मिलने की इस घटना को सूक्ष्म जीव विज्ञान में जीवाणुओं को दूषित करना कहा जाता है। सूक्ष्मजीवविज्ञान संबंधी कार्यों में संदूषण को रोकना एक महत्वपूर्ण तकनीक है। एक ओर पूर्ण जीवाणुरहितीकरण और दूसरी ओर संदूषण की रोकथाम, सड़न रोकने वाली तकनीक के दो पहलू हैं। इसके अतिरिक्त, हमें अध्ययनाधीन सूक्ष्मजीवों, विशेष रूप से रोगजनक सूक्ष्मजीवों या आनुवंशिक रूप से संशोधित सूक्ष्मजीवों, जो प्रकृति में मौजूद नहीं हैं, को हमारे प्रायोगिक कंटेनरों से बाहरी वातावरण में जाने से रोकना होगा। इन उद्देश्यों के लिए, सूक्ष्म जीव विज्ञान में, कई उपाय हैं।

जीवाणुरहित कक्ष आमतौर पर सूक्ष्म जीव विज्ञान प्रयोगशाला में विशेष रूप से स्थापित एक छोटा कमरा होता है। इसे चादरों और काँच से बनाया जा सकता है। क्षेत्रफल बहुत बड़ा नहीं होना चाहिए, लगभग 4-5 वर्ग मीटर, और ऊँचाई लगभग 2.5 मीटर होनी चाहिए। जीवाणुरहित कक्ष के बाहर एक बफर कक्ष स्थापित किया जाना चाहिए। बफर कक्ष और जीवाणुरहित कक्ष का दरवाज़ा एक ही दिशा में नहीं होना चाहिए ताकि हवा के प्रवाह से विविध जीवाणुओं को अंदर आने से रोका जा सके। जीवाणुरहित कक्ष और बफर कक्ष दोनों वायुरोधी होने चाहिए। आंतरिक वेंटिलेशन उपकरणों में वायु निस्पंदन उपकरण होने चाहिए। जीवाणुरहित कक्ष का फर्श और दीवारें चिकनी, गंदगी से मुक्त और साफ करने में आसान होनी चाहिए। कार्य सतह समतल होनी चाहिए। जीवाणुरहित कक्ष और बफर कक्ष दोनों पराबैंगनी प्रकाश व्यवस्था से सुसज्जित हैं। जीवाणुरहित कक्ष में पराबैंगनी प्रकाश व्यवस्था कार्य सतह से 1 मीटर की दूरी पर है। जीवाणुरहित कक्ष में प्रवेश करने वाले कर्मचारियों को जीवाणुरहित कपड़े और टोपी पहननी चाहिए।

वर्तमान में, स्टेराइल कमरे ज़्यादातर माइक्रोबायोलॉजी फ़ैक्टरियों में होते हैं, जबकि सामान्य प्रयोगशालाओं में क्लीन बेंच का इस्तेमाल होता है। क्लीन बेंच का मुख्य कार्य कार्य सतह पर सूक्ष्मजीवों सहित विभिन्न सूक्ष्म धूल को हटाने के लिए लेमिनार एयर फ्लो डिवाइस का उपयोग करना है। यह विद्युत उपकरण हवा को हेपा फ़िल्टर से गुज़रने और फिर कार्य सतह में प्रवेश करने देता है, ताकि कार्य सतह हमेशा प्रवाहित स्टेराइल हवा के नियंत्रण में रहे। इसके अलावा, बाहरी बैक्टीरिया वाली हवा को अंदर आने से रोकने के लिए बाहर की तरफ़ एक तेज़ गति वाला एयर कर्टेन भी होता है।

कठिन परिस्थितियों वाले स्थानों में, साफ़ बेंच की जगह लकड़ी के स्टेराइल बॉक्स का भी इस्तेमाल किया जा सकता है। स्टेराइल बॉक्स की संरचना सरल होती है और इसे आसानी से हिलाया जा सकता है। बॉक्स के सामने दो छेद होते हैं, जो काम न करने पर पुश-पुल दरवाजों से बंद हो जाते हैं। आप काम करते समय अपनी बाँहें अंदर की ओर फैला सकते हैं। सामने का ऊपरी हिस्सा अंदर से काम करने की सुविधा के लिए काँच से सुसज्जित है। बॉक्स के अंदर एक पराबैंगनी लैंप है, और बर्तन और बैक्टीरिया को बगल में लगे छोटे दरवाजे से अंदर डाला जा सकता है।

एसेप्टिक ऑपरेटिंग तकनीकें वर्तमान में न केवल सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान और अनुप्रयोगों में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती हैं, बल्कि कई जैव-प्रौद्योगिकियों में भी व्यापक रूप से उपयोग की जाती हैं। उदाहरण के लिए, ट्रांसजेनिक तकनीक, मोनोक्लोनल एंटीबॉडी तकनीक, आदि।