क्लीनरूम में बैक्टीरिया की पहचान का महत्व

क्लीनरूम में संदूषण के दो मुख्य स्रोत हैं: कण और सूक्ष्मजीव, जो मानवीय और पर्यावरणीय कारकों, या प्रक्रिया में संबंधित गतिविधियों के कारण उत्पन्न हो सकते हैं। सर्वोत्तम प्रयासों के बावजूद, संदूषण क्लीनरूम में प्रवेश कर ही जाएगा। विशिष्ट सामान्य संदूषण वाहकों में मानव शरीर (कोशिकाएँ, बाल), पर्यावरणीय कारक जैसे धूल, धुआँ, धुंध या उपकरण (प्रयोगशाला उपकरण, सफाई उपकरण), और अनुचित सफाई तकनीकें और सफाई विधियाँ शामिल हैं।

सबसे आम संदूषण वाहक लोग होते हैं। सबसे सख्त कपड़ों और सबसे कठोर संचालन प्रक्रियाओं के बावजूद, अनुचित रूप से प्रशिक्षित ऑपरेटर क्लीनरूम में संदूषण का सबसे बड़ा खतरा हैं। क्लीनरूम दिशानिर्देशों का पालन न करने वाले कर्मचारी एक उच्च जोखिम कारक हैं। जब तक एक कर्मचारी गलती करता है या एक कदम भूल जाता है, तब तक पूरे क्लीनरूम में संदूषण फैल जाएगा। कंपनी केवल निरंतर निगरानी और प्रशिक्षण के निरंतर अद्यतन के माध्यम से ही क्लीनरूम की स्वच्छता सुनिश्चित कर सकती है, जिसमें संदूषण की दर शून्य हो।

संदूषण के अन्य प्रमुख स्रोत औज़ार और उपकरण हैं। यदि किसी गाड़ी या मशीन को क्लीनरूम में प्रवेश करने से पहले केवल मोटे तौर पर पोंछा जाता है, तो यह सूक्ष्मजीवों को ला सकता है। अक्सर, श्रमिकों को पता नहीं होता है कि पहिएदार उपकरण दूषित सतहों पर लुढ़कते हैं क्योंकि उन्हें क्लीनरूम में धकेला जाता है। सतहों (फर्श, दीवारें, उपकरण, आदि सहित) का नियमित रूप से व्यवहार्य गणना के लिए परीक्षण किया जाता है, जिसमें ट्रिप्टिकेस सोया अगर (टीएसए) और सबाउरोड डेक्सट्रोज अगर (एसडीए) जैसे विकास माध्यमों से युक्त विशेष रूप से डिज़ाइन की गई संपर्क प्लेटों का उपयोग किया जाता है। टीएसए एक विकास माध्यम है जो बैक्टीरिया के लिए डिज़ाइन किया गया है, और एसडीए एक विकास माध्यम है जो फफूंद और खमीर के लिए डिज़ाइन किया गया है। टीएसए और एसडीए को आम तौर पर अलग-अलग तापमानों पर इनक्यूबेट किया जाता है

वायु प्रवाह कभी प्रदूषण का एक आम कारण हुआ करता था, लेकिन आज के क्लीनरूम एचवीएसी सिस्टम ने वायु प्रदूषण को लगभग समाप्त कर दिया है। क्लीनरूम में हवा को नियमित रूप से (जैसे, दैनिक, साप्ताहिक, त्रैमासिक) कण गणना, व्यवहार्य गणना, तापमान और आर्द्रता के लिए नियंत्रित और निगरानी की जाती है। HEPA फ़िल्टर हवा में कणों की संख्या को नियंत्रित करने के लिए उपयोग किए जाते हैं और इनमें 0.2µm तक के कणों को फ़िल्टर करने की क्षमता होती है। कमरे में वायु की गुणवत्ता बनाए रखने के लिए इन फ़िल्टरों को आमतौर पर एक निश्चित प्रवाह दर पर लगातार चालू रखा जाता है। नमी को आमतौर पर कम स्तर पर रखा जाता है ताकि बैक्टीरिया और फफूंदी जैसे सूक्ष्मजीवों के प्रसार को रोका जा सके, जो आर्द्र वातावरण पसंद करते हैं।

वास्तव में, क्लीनरूम में संदूषण का उच्चतम स्तर और सबसे आम स्रोत ऑपरेटर ही है।

संदूषण के स्रोत और प्रवेश मार्ग उद्योग दर उद्योग बहुत भिन्न नहीं होते, लेकिन संदूषण के सहनीय और असहनीय स्तरों के संदर्भ में उद्योगों के बीच अंतर होता है। उदाहरण के लिए, निगलने योग्य गोलियों के निर्माताओं को मानव शरीर में सीधे डाले जाने वाले इंजेक्शन योग्य एजेंटों के निर्माताओं जितनी स्वच्छता बनाए रखने की आवश्यकता नहीं होती।

उच्च तकनीक वाले इलेक्ट्रॉनिक निर्माताओं की तुलना में दवा निर्माता सूक्ष्मजीवी संदूषण के प्रति कम सहनशील होते हैं। सूक्ष्म उत्पाद बनाने वाले सेमीकंडक्टर निर्माता उत्पाद की कार्यक्षमता सुनिश्चित करने के लिए किसी भी प्रकार के कणीय संदूषण को स्वीकार नहीं कर सकते। इसलिए, ये कंपनियाँ केवल मानव शरीर में प्रत्यारोपित किए जाने वाले उत्पाद की रोगाणुहीनता और चिप या मोबाइल फ़ोन की कार्यक्षमता के बारे में चिंतित रहती हैं। क्लीनरूम में फफूंद, फफूंदी या अन्य प्रकार के सूक्ष्मजीवी संदूषण के बारे में वे अपेक्षाकृत कम चिंतित होती हैं। दूसरी ओर, दवा कंपनियाँ संदूषण के सभी जीवित और मृत स्रोतों के बारे में चिंतित रहती हैं।

दवा उद्योग FDA द्वारा विनियमित है और उसे अच्छे विनिर्माण व्यवहार (GMP) नियमों का कड़ाई से पालन करना आवश्यक है क्योंकि दवा उद्योग में संदूषण के परिणाम बेहद हानिकारक होते हैं। दवा निर्माताओं को न केवल यह सुनिश्चित करना होता है कि उनके उत्पाद जीवाणु मुक्त हों, बल्कि उन्हें हर चीज़ का दस्तावेज़ीकरण और ट्रैकिंग भी करनी होती है। एक उच्च-तकनीकी उपकरण कंपनी लैपटॉप या टीवी भेज सकती है, बशर्ते वह आंतरिक ऑडिट में पास हो जाए। लेकिन दवा उद्योग के लिए यह इतना आसान नहीं है, इसलिए किसी भी कंपनी के लिए क्लीनरूम संचालन प्रक्रियाओं का होना, उनका उपयोग करना और उनका दस्तावेज़ीकरण करना बेहद ज़रूरी है। लागत संबंधी चिंताओं के कारण, कई कंपनियां सफाई सेवाओं के लिए बाहरी पेशेवर सफाई सेवाओं को नियुक्त करती हैं।

एक व्यापक क्लीनरूम पर्यावरण परीक्षण कार्यक्रम में दृश्य और अदृश्य वायुजनित कणों को शामिल किया जाना चाहिए। हालाँकि, यह आवश्यक नहीं है कि इन नियंत्रित वातावरणों में सभी प्रदूषकों की पहचान सूक्ष्मजीवों द्वारा की जाए। पर्यावरण नियंत्रण कार्यक्रम में नमूनों के निष्कर्षण की जीवाणु पहचान का उचित स्तर शामिल होना चाहिए। वर्तमान में जीवाणु पहचान के कई तरीके उपलब्ध हैं।

बैक्टीरिया की पहचान में पहला कदम, खासकर क्लीनरूम अलगाव के मामले में, ग्राम स्टेन विधि है, क्योंकि यह सूक्ष्मजीवी संदूषण के स्रोत के बारे में व्याख्यात्मक सुराग प्रदान कर सकता है। यदि सूक्ष्मजीवी अलगाव और पहचान में ग्राम-पॉजिटिव कोकी दिखाई देते हैं, तो संदूषण मनुष्यों से आया हो सकता है। यदि सूक्ष्मजीवी अलगाव और पहचान में ग्राम-पॉजिटिव रॉड दिखाई देते हैं, तो संदूषण धूल या कीटाणुनाशक-प्रतिरोधी स्ट्रेन से आया हो सकता है। यदि सूक्ष्मजीवी अलगाव और पहचान में ग्राम-नेगेटिव रॉड दिखाई देते हैं, तो संदूषण का स्रोत पानी या किसी गीली सतह से आया हो सकता है।

फार्मास्युटिकल क्लीनरूम में सूक्ष्मजीवों की पहचान अत्यंत आवश्यक है क्योंकि यह गुणवत्ता आश्वासन के कई पहलुओं से संबंधित है, जैसे कि विनिर्माण वातावरण में जैव-परीक्षण; अंतिम उत्पादों का जीवाणु पहचान परीक्षण; जीवाणुरहित उत्पादों और जल में अज्ञात जीवाणु; जैव प्रौद्योगिकी उद्योग में किण्वन भंडारण तकनीक का गुणवत्ता नियंत्रण; और सत्यापन के दौरान सूक्ष्मजीव परीक्षण सत्यापन। यह पुष्टि करने का FDA का तरीका कि जीवाणु किसी विशिष्ट वातावरण में जीवित रह सकते हैं, अधिकाधिक प्रचलित होता जाएगा। जब सूक्ष्मजीव संदूषण का स्तर निर्दिष्ट स्तर से अधिक हो जाता है या बाँझपन परीक्षण के परिणाम संदूषण का संकेत देते हैं, तो सफाई और कीटाणुशोधन एजेंटों की प्रभावशीलता की जाँच करना और संदूषण के स्रोतों की पहचान को समाप्त करना आवश्यक है।

क्लीनरूम पर्यावरणीय सतहों की निगरानी के लिए दो विधियाँ हैं:

1. संपर्क प्लेटें

इन विशेष कल्चर डिशों में जीवाणुरहित वृद्धि माध्यम होता है, जिसे डिश के किनारे से ऊँचा रखने के लिए तैयार किया जाता है। संपर्क प्लेट कवर नमूने की जाने वाली सतह को ढक देता है, और सतह पर दिखाई देने वाले सभी सूक्ष्मजीव अगर सतह से चिपक जाएँगे और विकसित होंगे। इस तकनीक से सतह पर दिखाई देने वाले सूक्ष्मजीवों की संख्या का पता लगाया जा सकता है।

2. स्वाब विधि

यह जीवाणुरहित होता है और एक उपयुक्त जीवाणुरहित द्रव में संग्रहित किया जाता है। स्वाब को परीक्षण सतह पर लगाया जाता है और माध्यम में स्वाब को पुनः स्थापित करके सूक्ष्मजीव की पहचान की जाती है। स्वाब का उपयोग अक्सर असमान सतहों पर या उन क्षेत्रों में किया जाता है जहाँ संपर्क प्लेट से नमूना लेना मुश्किल होता है। स्वाब नमूनाकरण एक गुणात्मक परीक्षण है।