क्लीनरूम में बैक्टीरिया की पहचान का महत्व

क्लीनरूम में संदूषण के दो मुख्य स्रोत हैं: कण और सूक्ष्मजीव, जो मानवीय और पर्यावरणीय कारकों या प्रक्रिया से संबंधित गतिविधियों के कारण उत्पन्न हो सकते हैं। सर्वोत्तम प्रयासों के बावजूद, संदूषण क्लीनरूम में प्रवेश कर ही जाता है। संदूषण के विशिष्ट सामान्य वाहकों में मानव शरीर (कोशिकाएं, बाल), धूल, धुआं, धुंध जैसे पर्यावरणीय कारक या उपकरण (प्रयोगशाला उपकरण, सफाई उपकरण) और अनुचित पोंछने की तकनीक और सफाई विधियां शामिल हैं।

संक्रमण का सबसे आम वाहक मनुष्य ही होते हैं। कड़े से कड़े वस्त्र और सख्त संचालन प्रक्रियाओं के बावजूद, अपर्याप्त प्रशिक्षण प्राप्त ऑपरेटर क्लीनरूम में संक्रमण का सबसे बड़ा खतरा होते हैं। क्लीनरूम दिशानिर्देशों का पालन न करने वाले कर्मचारी उच्च जोखिम कारक होते हैं। एक कर्मचारी की गलती या किसी चरण का भूल मात्र से ही पूरे क्लीनरूम में संक्रमण फैल सकता है। कंपनी क्लीनरूम की स्वच्छता को केवल निरंतर निगरानी और निरंतर प्रशिक्षण अद्यतन के माध्यम से ही सुनिश्चित कर सकती है, जिसमें संक्रमण की दर शून्य हो।

संदूषण के अन्य प्रमुख स्रोत औजार और उपकरण हैं। यदि क्लीनरूम में प्रवेश करने से पहले किसी गाड़ी या मशीन को केवल ऊपरी तौर पर पोंछा जाता है, तो उसमें सूक्ष्मजीव आ सकते हैं। अक्सर, श्रमिकों को इस बात की जानकारी नहीं होती कि पहिएदार उपकरण क्लीनरूम में धकेलते समय दूषित सतहों पर से गुजरते हैं। सतहों (फर्श, दीवारें, उपकरण आदि सहित) की नियमित रूप से जीवित सूक्ष्मजीवों की संख्या की जांच विशेष रूप से डिज़ाइन की गई संपर्क प्लेटों का उपयोग करके की जाती है, जिनमें ट्रिप्टिकेस सोया अगर (टीएसए) और सबौराउड डेक्सट्रोज अगर (एसडीए) जैसे वृद्धि माध्यम होते हैं। टीएसए जीवाणुओं के लिए डिज़ाइन किया गया वृद्धि माध्यम है, और एसडीए फफूंद और खमीर के लिए डिज़ाइन किया गया वृद्धि माध्यम है। टीएसए और एसडीए को आमतौर पर अलग-अलग तापमान पर इनक्यूबेट किया जाता है, जिसमें टीएसए को 30-35 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर रखा जाता है, जो अधिकांश जीवाणुओं के लिए इष्टतम वृद्धि तापमान है। 20-25 डिग्री सेल्सियस का तापमान अधिकांश फफूंद और खमीर प्रजातियों के लिए इष्टतम है।

पहले वायु प्रवाह प्रदूषण का एक प्रमुख कारण हुआ करता था, लेकिन आज के क्लीनरूम एचवीएसी सिस्टम ने वायु प्रदूषण को लगभग पूरी तरह से समाप्त कर दिया है। क्लीनरूम में वायु की नियमित रूप से (जैसे दैनिक, साप्ताहिक, त्रैमासिक) कणों की संख्या, जीवित सूक्ष्मजीवों की संख्या, तापमान और आर्द्रता की निगरानी की जाती है। वायु में कणों की संख्या को नियंत्रित करने के लिए एचईपीए फिल्टर का उपयोग किया जाता है, जो 0.2µm तक के कणों को छानने में सक्षम होते हैं। कमरे में वायु की गुणवत्ता बनाए रखने के लिए इन फिल्टरों को आमतौर पर एक निर्धारित प्रवाह दर पर लगातार चलाया जाता है। आर्द्रता को आमतौर पर कम स्तर पर रखा जाता है ताकि बैक्टीरिया और फफूंद जैसे सूक्ष्मजीवों के पनपने को रोका जा सके, जो नम वातावरण में पनपते हैं।

दरअसल, क्लीनरूम में संदूषण का सबसे उच्च स्तर और सबसे आम स्रोत ऑपरेटर ही होता है।

संदूषण के स्रोत और प्रवेश मार्ग एक उद्योग से दूसरे उद्योग में बहुत अधिक भिन्न नहीं होते हैं, लेकिन संदूषण के स्वीकार्य और अस्वीकार्य स्तरों के मामले में उद्योगों के बीच अंतर होता है। उदाहरण के लिए, निगलने वाली गोलियों के निर्माताओं को उतनी स्वच्छता बनाए रखने की आवश्यकता नहीं होती जितनी कि मानव शरीर में सीधे डाले जाने वाले इंजेक्शनों के निर्माताओं को।

दवा निर्माता कंपनियां उच्च तकनीक वाले इलेक्ट्रॉनिक निर्माताओं की तुलना में सूक्ष्मजीवों से होने वाले संदूषण को कम सहन करती हैं। सूक्ष्म उत्पाद बनाने वाले सेमीकंडक्टर निर्माता उत्पाद की कार्यक्षमता सुनिश्चित करने के लिए किसी भी प्रकार के कणिकीय संदूषण को बर्दाश्त नहीं कर सकते। इसलिए, ये कंपनियां केवल मानव शरीर में प्रत्यारोपित किए जाने वाले उत्पाद की रोगाणुहीनता और चिप या मोबाइल फोन की कार्यक्षमता को लेकर चिंतित रहती हैं। क्लीनरूम में मोल्ड, कवक या अन्य प्रकार के सूक्ष्मजीवों से होने वाले संदूषण के प्रति उनकी चिंता अपेक्षाकृत कम होती है। दूसरी ओर, दवा निर्माता कंपनियां संदूषण के सभी जीवित और मृत स्रोतों को लेकर चिंतित रहती हैं।

दवा उद्योग एफडीए द्वारा विनियमित है और इसे गुड मैन्युफैक्चरिंग प्रैक्टिसेज (जीएमपी) नियमों का सख्ती से पालन करना अनिवार्य है, क्योंकि दवा उद्योग में संदूषण के परिणाम बहुत हानिकारक होते हैं। दवा निर्माताओं को न केवल यह सुनिश्चित करना होता है कि उनके उत्पाद जीवाणु-मुक्त हों, बल्कि उन्हें हर चीज का दस्तावेजीकरण और ट्रैकिंग भी करनी होती है। एक उच्च-तकनीकी उपकरण कंपनी अपने आंतरिक ऑडिट में पास होने पर लैपटॉप या टीवी भेज सकती है। लेकिन दवा उद्योग के लिए यह इतना आसान नहीं है, इसलिए किसी भी कंपनी के लिए क्लीनरूम संचालन प्रक्रियाओं का पालन करना, उनका उपयोग करना और उनका दस्तावेजीकरण करना अत्यंत महत्वपूर्ण है। लागत संबंधी कारणों से, कई कंपनियां सफाई सेवाओं के लिए बाहरी पेशेवर सफाई सेवाओं को नियुक्त करती हैं।

एक व्यापक क्लीनरूम पर्यावरण परीक्षण कार्यक्रम में दृश्य और अदृश्य वायुजनित कणों को शामिल किया जाना चाहिए। हालांकि, यह अनिवार्य नहीं है कि इन नियंत्रित वातावरणों में सभी संदूषकों की पहचान सूक्ष्मजीवों द्वारा की जाए। पर्यावरण नियंत्रण कार्यक्रम में नमूना निष्कर्षण के जीवाणु पहचान का उचित स्तर शामिल होना चाहिए। वर्तमान में कई जीवाणु पहचान विधियां उपलब्ध हैं।

बैक्टीरिया की पहचान का पहला चरण, विशेष रूप से क्लीनरूम आइसोलेशन के संदर्भ में, ग्राम स्टेन विधि है, क्योंकि यह सूक्ष्मजीवों के संदूषण के स्रोत के बारे में महत्वपूर्ण संकेत प्रदान कर सकती है। यदि सूक्ष्मजीवों के आइसोलेशन और पहचान में ग्राम-पॉजिटिव कोकी दिखाई देते हैं, तो संदूषण मनुष्यों से आया हो सकता है। यदि सूक्ष्मजीवों के आइसोलेशन और पहचान में ग्राम-पॉजिटिव रॉड दिखाई देते हैं, तो संदूषण धूल या कीटाणुनाशक-प्रतिरोधी बैक्टीरिया से आया हो सकता है। यदि सूक्ष्मजीवों के आइसोलेशन और पहचान में ग्राम-नेगेटिव रॉड दिखाई देते हैं, तो संदूषण का स्रोत पानी या कोई भी गीली सतह हो सकती है।

फार्मास्युटिकल क्लीनरूम में सूक्ष्मजीवों की पहचान अत्यंत आवश्यक है क्योंकि यह गुणवत्ता आश्वासन के कई पहलुओं से संबंधित है, जैसे विनिर्माण वातावरण में जैव परीक्षण; अंतिम उत्पादों का जीवाणु पहचान परीक्षण; रोगाणु रहित उत्पादों और पानी में अज्ञात जीवों की पहचान; जैव प्रौद्योगिकी उद्योग में किण्वन भंडारण प्रौद्योगिकी का गुणवत्ता नियंत्रण; और सत्यापन के दौरान सूक्ष्मजीव परीक्षण का प्रमाणीकरण। एफडीए द्वारा किसी विशिष्ट वातावरण में जीवाणुओं के जीवित रहने की पुष्टि करने की विधि अधिकाधिक प्रचलित होती जा रही है। जब सूक्ष्मजीव संदूषण का स्तर निर्धारित स्तर से अधिक हो जाता है या रोगाणुहीनता परीक्षण के परिणाम संदूषण का संकेत देते हैं, तो सफाई और कीटाणुशोधन एजेंटों की प्रभावशीलता को सत्यापित करना और संदूषण के स्रोतों की पहचान करना आवश्यक हो जाता है।

क्लीनरूम की पर्यावरणीय सतहों की निगरानी के लिए दो तरीके हैं:

1. संपर्क प्लेटें

इन विशेष कल्चर डिश में रोगाणु रहित वृद्धि माध्यम होता है, जिसे डिश के किनारे से ऊपर तक भरा जाता है। कॉन्टैक्ट प्लेट कवर नमूना लेने वाली सतह को ढक लेता है, और सतह पर दिखाई देने वाले सभी सूक्ष्मजीव अगर सतह से चिपक जाते हैं और विकसित होने लगते हैं। यह तकनीक सतह पर दिखाई देने वाले सूक्ष्मजीवों की संख्या दर्शा सकती है।

2. स्वाब विधि

यह रोगाणुरहित होता है और इसे उपयुक्त रोगाणुरहित तरल में संग्रहित किया जाता है। स्वाब को परीक्षण सतह पर लगाया जाता है और माध्यम में स्वाब को पुनः प्राप्त करके सूक्ष्मजीव की पहचान की जाती है। स्वाब का उपयोग अक्सर असमान सतहों पर या उन क्षेत्रों में किया जाता है जहाँ संपर्क प्लेट से नमूना लेना मुश्किल होता है। स्वाब नमूनाकरण एक गुणात्मक परीक्षण है।